Регенеративная медицина на экваторе женского здоровья и качества жизни
«РЕГЕНЕРАТИВНАЯ МЕДИЦИНА НА ЭКВАТОРЕ ЖЕНСКОГО ЗДОРОВЬЯ И КАЧЕСТВА ЖИЗНИ»: РОЛЬ МИКРОФРАГМЕНТИРОВАННОЙ СТРОМАЛЬНО-ВАСКУЛЯРНОЙ ФРАКЦИИ АДИПОЗНОЙ ТКАНИ В СОВРЕМЕННОЙ РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ ОРАЗОВ М.Р.1, РАДЗИНСКИЙ В.Е.1, КИСЕЛЁВА М.В.2, ДОЛГОВ Е.Д.1.
1 ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов», 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6; 2 Медицинский радиологический научный центр им. А.Ф. Цыба- филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России
Сведения об авторах:
Оразов Мекан Рахимбердыевич - д. м. н., профессор кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии Медицинского института ФГАОУ ВО «РУДН». 117198, Россия, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6. E-mail: omekan@mail.ru, ORCID: 0000-0002-5342-8129
Радзинский Виктор Евсеевич – заслуженный деятель науки РФ, член-корреспондент РАН, д. м. н., профессор, заведующий кафедрой акушерства и гинекологии с курсом перинатологии Медицинского института ФГАОУ ВО РУДН. 117198, Россия, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6. E-mail: radzinsky@mail.ru; ORCID: 0000-0002-7428-0469.
Киселева Марина Викторовна - д.м.н., заведующая отделением новых медицинских технологий с группой лечения заболеваний молочной железы ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздарава России, профессор кафедры акушерства и гинекологии ИПК ФМБА Минз, Обнинск. E-mail: kismarvic@mail.ru.
Долгов Евгений Денисович - клинический ординатор кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии, Медицинский институт, ФГАОУ ВО Российский университет дружбы народов. Российская Федерация Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6. E-mail: 1586dolgde@gmail.com. ORCID: 0000-0001-6709-5209.
Резюме. Регенеративная медицина остается наиболее стремительно развивающимся и инновационным разделом современной медицины. Ключевым субстратом тканевой регенерации является стволовая клетка, имеющая различные пути дифференцировки и являющаяся источником для различных морфотипов тканей. В этой связи медицинское сообщество задалось закономерным вопросом о потенциале использования стволовых клеток с целью лечения различных нозологий, в том числе и гинекологических. Одним из наиболее интересных, прогрессивных и удобных методов регенеративной медицины является использование микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции аутологичной адипозной ткани. Исходя из этого, необходимо разобраться в молекулярно-биологических особенностях данной субстанции и оценить ее потенциал в рамках коррекции различных гинекологических заболеваний.
Ключевые слова: регенеративная медицина, микрофрагментированная стромально-васкулярная фракция, адипозная ткань, стволовые клетки. "Regenerative medicine at the equator of women's health and quality of life": the role of microfragmented stromal-vascular fraction of adipose tissue in modern regenerative medicine
Summary. Regenerative medicine remains the most rapidly growing and innovative branch of modern medicine. The key substrate of tissue regeneration is the stem cell, which has various differentiation pathways and is the source for various tissue morphotypes. In this regard, the medical community has asked a legitimate question about the potential of using stem cells for the treatment of various nosologies, including gynaecological ones. One of the most interesting, progressive and convenient methods of regenerative medicine is the use of microfragmented stromal-vascular fraction of autologous adipose tissue. On this basis, it is necessary to understand the molecular-biological features of this substance and evaluate its potential within the framework of correction of various gynaecological diseases.
Keywords: regenerative medicine, microfragmented stromal-vascular fraction, adipose tissue, stem cells.
На стыке регенеративной медицины и гинекологии На протяжении всей истории человечества философские вопросы, направленные на раскрытие тайн мироздания и поиск своего предназначения, являлись и являются по сей день «двигателем» идеологической эволюции мира. С самых древних времен люди искали ключ к излечению всех заболеваний и эволюционно прошли через множество этапов, включая шаманство, использование лекарственных растений, поиск философского камня и т.д. Однако универсального ответа на миллионы вопросов медицины найдено не было. Но и поиски на этом не закончились. Последнее столетие в эволюции медицины как науки до сих пор сотрясает мир революционными открытиями: робот-ассистированная хирургия, таргетная терапия злокачественных новообразований, телемедицинские технологии и многое другое. Но вместе с тем, уже долгое время наиболее перспективным направлением является регенеративная медицина.
Согласно общепринятому определению, регенеративная медицина — это междисциплинарный раздел современной медицинской науки, изучающий методы медико-биологической инженерии с целью регенерации различных типов тканей [1]. Между тем, регенерация (восстановление) — способность живых организмов со временем восстанавливать повреждённые ткани.
Виды регенерации [1]:
1.Физиологическая
2.Репаративная
3.Патологическая.
Физиологическая регенерация предусматривает процессы восстановления и обновления в каждом организме на протяжении всей его жизни, а репаративной называют регенерацию, происходящую после повреждения или утраты какой-либо части тела.
Ключевым механизмом тканевой регенерации является активная пролиферация клеток-предшественниц, активируемая вследствие альтерации. Благодаря ряду революционных открытий стало очевидно, что главным субстратом тканевой регенерации и регенеративной медицины является стволовая клетка. Стремительное развитие цитологии привело нас к пониманию того, что каждая зрелая клетка нашего организма является дочерней и развивается из целой цепочки т.н. прогениторных клеток, обладающих различным потенциалом мультипотентности (каждая новая клеточная популяция имеет более ограниченный потенциал относительно предыдущей генерации). Однако «вершиной» этой цепочки является стволовая клетка-предшественница, обладающая высоким пролиферативным, регенераторным и молекулярно-биологическим потенциалом [2]. Открытие этих свойств стволовых клеток создали ряд перспектив перед медицинским сообществом: от возможности выращивания отдельных тканей и органов с целью дальнейшей трансплантации до регенерации поврежденных тканей «in situ». И в этой связи стало совершенно очевидно, что регенеративная медицина является всеобъемлющей и охватывает все медицинские специальности.
На сегодняшний день в мире активно используется микрофрагментированная стромально-васкулярная фракция адипозной ткани с целью регенерации тканей «in situ». За последнее время терапия стромально-васкулярной фракцией широко зарекомендовала себя в самых различных областях медицины и, конечно же, «не обошла стороной» современную гинекологию. Огромный спектр позитивных молекулярно-биологических эффектов данной субстанции и простота ее выделения характеризует ее как наилучшего «кандидата» для патогенетически оправданной регенеративной коррекции ряда гинекологических нозологий.
Исходя из вышесказанного, важно отметить, что целью данной статьи является освещение крайне актуального и, вместе с тем, не менее инновационного вопроса о месте терапии микрофрагментированной стромально-васкулярной фракцией (SVF-терапия) в современной гинекологии.
SVF-терапия- новое слово в современной гинекологии
Микрофрагментированная стромально-васкулярная фракция (Stromal-Vascular Fraction (SVF)) является универсальной биологически-активной субстанцией. В состав SVF входит целый комплекс стволовых клеточных структур и факторов роста, обуславливающих ее высокий регенераторный потенциал. Ключевой особенностью стромально-васкулярной фракции является полная синергичность молекулярно-биологических эффектов со стороны всех ее составляющих, что обуславливает ее высокую эффективность и универсальность для использования в самых различных сферах медицины [3]. На сегодняшний момент доказано, что микрофрагментированная стромально-васкулярная фракция обладает:
● Выраженным регенераторным эффектом;
● Проангиогенным эффектом;
● Противовоспалительным эффектом;
● Иммуномодулирующим эффектом.
Важно отметить, что молекулярно-клеточный состав стромально-васкулярной фракции является внушительным. Основными клеточными элементами СВФ являются: стволовые клетки жировой ткани, преадипоциты, эндотелиальные клетки-предшественницы, эндотелиоциты, Т-лимфоциты, макрофаги, гладкомышечные клетки, перициты, а также мезенхимальные стволовые клетки. Необходимо упомянуть, что каждый клеточный элемент стромально-васкулярной фракции отличается не только своими морфологическими характеристиками, но и составом своих молекулярных маркеров, что позволило подобрать максимально удачный состав СВФ благодаря использованию современных фрагментирующих технологий (таб.1) [4]. В этой связи важно тезисно рассмотреть функционал каждой клетки СВФ и отметить ее клинико-биологический потенциал.
Таблица 1 [4].
Мезенхимальная стволовая клетка (МСК) играет ключевую роль в составе стромально-васкулярной фракции. Важно отметить, что МСК является универсальным предшественником для большинства тканей организма. Потенциал дифференцировки данного клеточного элемента существенно превышает таковой у других клеток. В сравнении с гемопоэтическими стволовыми клетками МСК носят на поверхности гораздо больше молекулярных маркеров, включая CD34, CD45, CD14, HLA-DR, что отражает их поразительную универсальность и больший спектр возможных взаимодействий [5]. В процессе эмбриогенеза мезенхимальная стволовая клетка имеет 3 пути дифференцировки:
1) Эктодерма (например, нервная ткань)- за счет действия протеинкиназы-А и белка Notch-1;
2) Энтодерма (например, гепатоциты, секреторные островки и т.д.)- за счет взаимодействия с трансформирующим фактором роста (ТФР);
3) Мезодерма (например, остеоциты, хондроциты, адипоциты и т.д.)- также за счет взаимодействия с ТФР, а также рядом факторов (PPAR, Smad3, SOX9).
Таким образом, приоритетная роль мезенхимальной стволовой клетки в стромально-васкулярной фракции отводится именно регенерации ткани. Большое разнообразие линий дифференцировки позволяет использовать МСК как универсальный клеточный источник, стимулируемый паракринно за счет локально продуцируемых факторов роста и сигнальных белков.
Следующим не менее важным звеном в составе стромально-васкулярной фракции являются Т-лимфоциты. Их ключевая функция- поддержание локального иммунного гомеостаза в месте введения СВФ. Т-лимфоциты обладают выраженной паракринной активностью за счет способности к продукции ряда цитокинов [6, 7].
Важно отметить, что Т-хелперы 2 типа активируют ещё одно клеточное звено- тканевые макрофаги 2 типа, также способствующие поддержанию клеточно-молекулярного баланса. Данная субпопуляция макрофагов обладает выраженной противовоспалительной активностью за счет способности к выработке противовоспалительных цитокинов, включая интерлейкины 4, 5, 9 и 13 типов. Также на сегодняшний день доказан и высокий регенераторный потенциал данной клеточной линии при наличии альтерации тканей [8, 9].
Следующим крайне важным компонентом стромально-васкулярной фракции являются адипозные стволовые клетки. Предшественники зрелых адипоцитов обладают выраженной паракринной активностью за счет продукции различных факторов роста, цитокинов и антиоксидантов в интерстиции. Кроме того, адипозные стволовые клетки реализуют противовоспалительный и иммуномодулирующий эффект в тканях за счет тех же молекулярных агентов. Вместе с тем, следует отметить, что активно пролиферирующие преадипоциты могут проявлять значимую фагоцитарную активность в отношении чужеродных микроорганизмов, то есть обладают макрофагоподобным эффектом [10, 11].
Необходимо также отметить гладкомышечные клетки, которые способствуют формированию каркаса в месте введения, восстановлению физиологичной гистоархитектоники и потенциируют армирующий эффект новосинтезированных (de nova) коллагеновых волокон [12].
Заключительным и наиболее важным компонентом в составе стромально-васкулярной фракции являются эндотелиальные стволовые клетки. Данный клеточный элемент обладает выраженным проангиогенным эффектом за счет продукции эндотелиального фактора роста, реализуя ключевые процессы неоангиогенеза. Кроме того, предшественники эндотелиоцитов контролируют реологические свойства крови, ингибируют воспалительные процессы и предотвращают гиперкоагуляционные состояния в тканях [13].
Исходя из вышесказанного, важно резюмировать, что все клеточные элементы стромально-васкулярной фракции демонстрируют функциональную разнонаправленность и одновременную синергичность, что позволяет достичь высокого регенераторного эффекта в месте введения субстанции.
Однако кроме клеточных элементов необходимо рассмотреть молекулярные агенты стромально-васкулярной фракции, способствующие поддержанию локального тканевого гомеостаза [10]:
1) Инсулиноподобный фактор роста-1 (ИПФР-1) способствует поддержанию дифференцировки и пролиферации адипозных стволовых клеток;
2) Фактор роста тромбоцитов поддерживает процессы дифференцировки и пролиферации клеточной массы, а также реализует антиапоптотический эффект и поддерживает процессы хемотаксиса мезенхимальных стволовых клеток;
3) Эндотелиальный фактор роста реализует ключевые процессы неоангиогенеза и васкуляризации ткани в месте введения СВФ;
4) Фактор роста фибробластов поддерживает локальные пролиферативные процессы, способствует рекрутингу и стимуляции активности фибробластов и, соответственно, продукции коллагеновых волокон, реализуя локальный армирующий эффект;
5) Матриксные металлопротеиназы способствуют развитию жировой ткани, а также утолщению и ремодерированию коллагеновых волокон.
Важно отметить, что за счет всех вышеописанных механизмов, реализуемых клеточными элементами и локально продуцируемыми биологически-активными агентами, стромально-васкулярная фракция реализует целый ряд позитивных молекулярно-биологических эффектов в месте введения субстанции [3]:
● Противовоспалительный эффект за счет снижения уровня интерлейкина 1-β и интерлейкина-6, а также супрессии катаболизма интерлейкина-1, связанной с активацией ИЛ-1Rα;
● Повышение уровня гликозаминогликанов за счет активной дифференцировки строгальной стволовой клетки и активации синтеза внеклеточного матрикса хондроцитами;
● Обеспечение тканевого гомеостаза за счет активации синтеза протеаз ADAMTS 4 и 5 типов, а также повышения уровня тканевых ингибиторов металлопротеиназ 1, 3 и 4 типов.
Таким образом, важно отметить, что каждый элемент микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции является одновременно самостоятельной единицей, но вместе с тем может регулироваться паракринно другими компонентами системы регенерации. В этой связи мы резюмируем, что стромально-васкулярная фракция- это весьма гармоничная со всех точек зрения биологически-активная субстанция, обладающая высоким регенеративным и терапевтическим потенциалом.
Методология микрофрагментации липоаспирата и получения микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции
До недавнего времени выделение микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции адипозной ткани возможно было только в лабораторных условиях, в частности в условиях центрифугирования. В итоге после проведения центрифугирования липоаспирата на скорости 2500-3000 оборотов в минуту в течение 4 минут при комнатной температуре способствовало фрагментации жидкости на несколько фракций [3]:
● Верхняя- жировая фракция;
● Средняя- конденсированный липоаспират;
● Нижняя- водная фракция;
● Стромально-васкулярная фракция.
Однако на сегодняшний день стало возможным использование портативных технологий выделения микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции адипозной ткани. Так, единственной зарегистрированной технологией портативного выделения СВФ из липоаспирата является LIPO-STEM DUOTM. Данный инструмент представляет стерильный одноразовый комплект, предназначенный для забора, микрофрагментации и очистки аутолипоаспирата. За счет технологии микрофильтрации в условиях замкнутого цикла также происходит фрагментация субстанции на фракции [14, 15].
Бережная технология фрагментация, используемая в портативных аппаратах микрофрагментации, имеет целый ряд преимуществ, включая эффективную микрофрагментацию липоаспирата, надежную очистку фрагментов тканей, высокое качество полученных клеток, а также быстрота процедуры (обработка 400 мл липоаспирата осуществляется за 5-10 минут) [15]. Учитывая вышесказанное, необходимо рассмотреть основные этапы проведения процедуры портативной микрофрагментации липоаспирата.
В рамках подготовительного этапа необходима подготовка т.н. раствора Кляйна. Данный раствор необходимо ввести локально в локусе липосакции, что позволит уменьшить объем кровопотери создать инфильтративный объём в данной области. В качестве источника липоаспирата возможно выбрать анатомические зоны: живот, ягодицы и бедро, при этом, живот является предпочтительным местом для проведения липосакции.
После забора аутологичного липоаспирата к разъему «WASH IN» необходимо подсоединить емкость с физиологическим раствором через инфузионную систему с целью выведения воздуха из системы в пакет для отходов и наполнения системы раствором.
После этого необходимо ввести через порт «LIPO IN» полученный липоаспират, а затем плавными движениями шпателя по пакету устройства необходимо провести липоаспират через внутренний фильтр в нижнюю часть устройства. Данный шаг способствует микрофрагментации и очищению липоаспирата от крови и липидных капель. Данный процесс выполняется, пока содержимое пакета не приобретет бледно-желтый цвет. Затем необходимо перекрыть поступление физиологического раствора, а его избыток вывести шпателем через открытый порт «WASH IN». Полученную субстанцию или уже сформированную микрофрагментированную стромально-васкулярную фракцию выводят через порт «LIPO OUT» для дальнейшего использования [14, 15].
Таким образом, важно отметить, что использование устройства LIPO-STEM DUOTM позволяет бережно получить высококачественную стромально-васкулярную фракцию путем микрофрагментации аутолипоаспирата за короткое время. Данный факт позволяет использовать портативные технологии для получения СВФ с высокой эффективностью и скоростью, что позволит существенно сократить время проведения процедуры и расходы клиники на лабораторное оборудование.
SVF- терапия в современной гинекологии:
на пути к «регенеративной революции»
На сегодняшний день спектр применения стромально-васкулярной фракции в медицине в целом является в буквальном смысле «безграничным». Так, на сегодняшний день доказано, что микрофрагментированная СВФ адипозной ткани с высокой клинической эффективностью и безопасностью активно используется в следующих областях медицины [16]:
● В офтальмологии: для лечения ишемической ретинопатии;
● В травматологии: для лечения остеоартритов, тендинопатий;
● В эндокринологии: для лечения диабетической стопы;
● В нейрохирургии: для регенерации периферических нервов;
● В пластической хирургии: для лечения атрофических деформаций;
● В онкологии: для лечения атрофических процессов после химиолучевой терапии;
На настоящий момент микрофрагментированная стромально-васкулярная фракция адипозной ткани в рамках современной гинекологии имеет наибольший потенциал в лечении склероатрофического лихена, а также ректовагинальных свищей [17]. В этой связи необходимо рассмотреть результаты имеющихся научных исследований, демонстрирующих высокую эффективность и безопасность использования СВФ в современной гинекологии.
Так, по данным Tamburino S. et al. (2016), использование SVF-терапии у пациенток с верифицированным склероатрофическим лихеном после хирургической коррекции имеющихся стриктур способствует выраженному снижению интенсивности клинической симптоматики и коррекции атрофических изменений вульвы. При этом было выявлено, что значительное нивелирование симптоматики у пациенток отмечался через 2 месяца после лечения, а затем показатели оставались стабильно высокими с небольшим увеличением между 2 и 5 месяцами [18].
Вместе с тем, необходимо отметить результаты исследования отечественных коллег, включавшего 24 пациентки с верифицированными ректовагинальными свищами после предшествующей химиолучевой терапии по поводу злокачественных новообразований органов репродуктивной системы. Согласно полученным данным, у пациенток на фоне SVF-терапии отмечалось стабильное уменьшение средних размеров свищей: диаметр до лечения- 2,5 см, через 3 месяца- 1,35 см, через 6 месяцев- 1,12 см. Кроме того было выявлено, что у всех пациенток отмечалась полная эпителизация свищей и полное отсутствие рецидивов [19].
Весьма интересными оказались результаты исследования Monreal, J. et al. (2020), включающего 39 пациенток с верифицированным склероатрофическим лихеном. В качестве терапии у пациенток был выполнен липографтинг вульвы с использованием аутологичной жировой ткани и стромально-васкулярной фракции. В результате было выявлено, что после терапии у 95% пациенток наблюдалось значимое снижение баллов согласно модифицированному опроснику вульвовагинальных симптомов как через 6, так и через 24 месяца после лечения (p<0,05). Было продемонстрировано значимое улучшение состояния пациенток по каждому из четырех доменов шкалы: симптомы и признаки заболевания, социальное функционирование и качество сексуальной жизни (p<0,05 по всем доменам) [20].
В заключение необходимо представить результаты клинического наблюдения Kim M. et al. (2021) двух пациенток 61 и 59 лет, перенесших химиолучевую терапию по поводу рака прямой кишки. У обеих пациенток после проведенного лечения были верифицированы ректовагинальные свищи. Исходя из этого, была проведена фистулопластика с последующим введением микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции адипозной ткани. В результате у обеих пациенток через 5 месяцев наблюдения вовсе не отмечалось признаков газовой и каковой инконтиненции, в течение 1 года рецидивов свищей не наблюдалось [21].
Заключение
Таким образом, в рамках данной статьи нам удалось рассмотреть весьма нестандартный вопрос использования микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции в регенеративной медицине. Установлена «регенеративная роль» каждого компонента (как молекулярного, так и клеточного) СВФ с точки зрения их биологических эффектов.
Важно отметить, что на сегодняшний день «доказательное досье» использования СВФ в различных сферах медицины является не столь внушительным ввиду новизны самой методики. Но несмотря на это, становится совершенно очевидно, что количество исследований разной степени доказательности, демонстрирующих эффективность и безопасность SVF-терапии, будет увеличиваться в геометрической прогрессии, поскольку данный метод является не только чрезвычайно удобным, но также патогенетически оправданным и эффективным.
Исходя из вышесказанного, необходимо отметить, что современная регенеративная медицина демонстрирует поразительные темпы развития и укрепляется в самых различных медицинских сферах, включая гинекологию. Можно предположить, что регенеративная медицина на современном этапе — это медицина «без границ», позволяющая пациентке и клиницисту быть на «одной волне»- «волне» в достижении клинического успеха и повышения качества жизни!
Список литературы
1. Mao, A.S. and Mooney, D.J., 2015. Regenerative medicine: Current therapies and future directions. Proceedings of the National Academy of Sciences, 112(47), pp.14452-14459.
2. Lovell-Badge, R., 2001. The future for stem cell research. Nature, 414(6859), pp.88-91.
3. Goncharov, E.N. et al., 2024. Analyzing the Clinical Potential of Stromal Vascular Fraction: A Comprehensive Literature Review. Medicina, 60(2), p.221.
4. Павлов В.Н. и др. СОВРЕМЕННЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ КЛИНИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ СТРОМАЛЬНО-ВАСКУЛЯРНОЙ ФРАКЦИИ ЖИРОВОЙ ТКАНИ // Медицинский вестник Башкортостана. 2020. №6 (90).
5. Ding, D.C., Shyu, W.C. and Lin, S.Z., 2011. Mesenchymal stem cells. Cell transplantation, 20(1), pp.5-14.
6. Busato, A. et al. Simple and Rapid Non-Enzymatic Procedure Allows the Isolation of Structurally Preserved Connective Tissue Micro-Fragments Enriched with SVF. Cells 2020, 10, 36.
7. Dulong, J. et al. CD40L-expressing CD4+ T cells prime adipose-derived stromal cells to produce inflammatory chemokines. Cytotherapy 2022, 24, 500–507.
8. Contreras, G.A. et al. Macrophage infiltration in the omental and subcutaneous adipose tissues of dairy cows with displaced abomasum. J. Dairy Sci. 2015, 98, 6176–6187.
9. Dey, A. et al. A multi-colour confocal microscopy method for identifying and enumerating macrophage subtypes and adherent cells in the stromal vascular fraction of human adipose. J. Immunol. Methods 2021, 491, 112988.
10. Bora, P.; Majumdar, A.S. Adipose tissue-derived stromal vascular fraction in regenerative medicine: A brief review on biology and translation. Stem Cell Res. Ther. 2017, 8, 145.
11. Matsuo, F.S. et al. RANKL induces beige adipocyte differentiation in preadipocytes. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2020, 318, E866–E877.
12. Guimarães-Camboa, N. et al. Pericytes of Multiple Organs Do Not Behave as Mesenchymal Stem Cells In Vivo. Cell Stem Cell 2017, 20, 345–359
13. Gulyaeva, O.; Dempersmier, J.; Sul, H.S. Genetic and epigenetic control of adipose development. Biochim. Biophys. Acta Mol. Cell Biol. Lipids 2019, 1864, 3–12
14. LIPO-STEM. Mesenchymal stem cells collection kit from adipose tissue. Surgical technique (BPB MEDICA).
15. [Электронный ресурс]: https://mst.ru/catalog/lipo-stem-duo/
16. Nguyen, Andrew, et al. "Stromal vascular fraction: A regenerative reality? Part 1: Current concepts and review of the literature." Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery 69.2 (2016): 170-179.
17. Bapat, A., 2022. Stem Cells and Recent Advances in Aesthetic and Regenerative Gynecology. Aesthetic and Regenerative Gynecology, pp.327-357.
18. Tamburino S. et al. The Role of Nanofat Grafting in Vulvar Lichen Sclerosus: A Preliminary Report. Arch Plast Surg. 2016 Jan;43(1):93-5. doi: 10.5999/aps.2016.43.1.93. Epub 2016 Jan 15. PMID: 26848453; PMCID: PMC4738136.
19. Терюшкова Ж.И., Васильев В.С., Важенин А.В. и др. Липографтинг и стромально-васкулярная фракция жировой ткани в лечении пациенток с постлучевыми ректовагинальными свищами. Онкологическая колопроктология. 2019;9(1):34–41
20. Monreal, J., 2020. Safety and efficacy of stromal vascular fraction enriched fat grafting therapy for vulvar lichen sclerosus. Cureus, 12(2).
21. Kim, M., Lew, D.H., Roh, T.S. and Song, S.Y., 2021. Stromal vascular fraction injection to treat intractable radiation-induced rectovaginal fistula. Archives of Plastic Surgery, 48(01), pp.127-130.
1 ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов», 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6; 2 Медицинский радиологический научный центр им. А.Ф. Цыба- филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России
Сведения об авторах:
Оразов Мекан Рахимбердыевич - д. м. н., профессор кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии Медицинского института ФГАОУ ВО «РУДН». 117198, Россия, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6. E-mail: omekan@mail.ru, ORCID: 0000-0002-5342-8129
Радзинский Виктор Евсеевич – заслуженный деятель науки РФ, член-корреспондент РАН, д. м. н., профессор, заведующий кафедрой акушерства и гинекологии с курсом перинатологии Медицинского института ФГАОУ ВО РУДН. 117198, Россия, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6. E-mail: radzinsky@mail.ru; ORCID: 0000-0002-7428-0469.
Киселева Марина Викторовна - д.м.н., заведующая отделением новых медицинских технологий с группой лечения заболеваний молочной железы ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздарава России, профессор кафедры акушерства и гинекологии ИПК ФМБА Минз, Обнинск. E-mail: kismarvic@mail.ru.
Долгов Евгений Денисович - клинический ординатор кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии, Медицинский институт, ФГАОУ ВО Российский университет дружбы народов. Российская Федерация Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6. E-mail: 1586dolgde@gmail.com. ORCID: 0000-0001-6709-5209.
Резюме. Регенеративная медицина остается наиболее стремительно развивающимся и инновационным разделом современной медицины. Ключевым субстратом тканевой регенерации является стволовая клетка, имеющая различные пути дифференцировки и являющаяся источником для различных морфотипов тканей. В этой связи медицинское сообщество задалось закономерным вопросом о потенциале использования стволовых клеток с целью лечения различных нозологий, в том числе и гинекологических. Одним из наиболее интересных, прогрессивных и удобных методов регенеративной медицины является использование микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции аутологичной адипозной ткани. Исходя из этого, необходимо разобраться в молекулярно-биологических особенностях данной субстанции и оценить ее потенциал в рамках коррекции различных гинекологических заболеваний.
Ключевые слова: регенеративная медицина, микрофрагментированная стромально-васкулярная фракция, адипозная ткань, стволовые клетки. "Regenerative medicine at the equator of women's health and quality of life": the role of microfragmented stromal-vascular fraction of adipose tissue in modern regenerative medicine
Summary. Regenerative medicine remains the most rapidly growing and innovative branch of modern medicine. The key substrate of tissue regeneration is the stem cell, which has various differentiation pathways and is the source for various tissue morphotypes. In this regard, the medical community has asked a legitimate question about the potential of using stem cells for the treatment of various nosologies, including gynaecological ones. One of the most interesting, progressive and convenient methods of regenerative medicine is the use of microfragmented stromal-vascular fraction of autologous adipose tissue. On this basis, it is necessary to understand the molecular-biological features of this substance and evaluate its potential within the framework of correction of various gynaecological diseases.
Keywords: regenerative medicine, microfragmented stromal-vascular fraction, adipose tissue, stem cells.
На стыке регенеративной медицины и гинекологии На протяжении всей истории человечества философские вопросы, направленные на раскрытие тайн мироздания и поиск своего предназначения, являлись и являются по сей день «двигателем» идеологической эволюции мира. С самых древних времен люди искали ключ к излечению всех заболеваний и эволюционно прошли через множество этапов, включая шаманство, использование лекарственных растений, поиск философского камня и т.д. Однако универсального ответа на миллионы вопросов медицины найдено не было. Но и поиски на этом не закончились. Последнее столетие в эволюции медицины как науки до сих пор сотрясает мир революционными открытиями: робот-ассистированная хирургия, таргетная терапия злокачественных новообразований, телемедицинские технологии и многое другое. Но вместе с тем, уже долгое время наиболее перспективным направлением является регенеративная медицина.
Согласно общепринятому определению, регенеративная медицина — это междисциплинарный раздел современной медицинской науки, изучающий методы медико-биологической инженерии с целью регенерации различных типов тканей [1]. Между тем, регенерация (восстановление) — способность живых организмов со временем восстанавливать повреждённые ткани.
Виды регенерации [1]:
1.Физиологическая
2.Репаративная
3.Патологическая.
Физиологическая регенерация предусматривает процессы восстановления и обновления в каждом организме на протяжении всей его жизни, а репаративной называют регенерацию, происходящую после повреждения или утраты какой-либо части тела.
Ключевым механизмом тканевой регенерации является активная пролиферация клеток-предшественниц, активируемая вследствие альтерации. Благодаря ряду революционных открытий стало очевидно, что главным субстратом тканевой регенерации и регенеративной медицины является стволовая клетка. Стремительное развитие цитологии привело нас к пониманию того, что каждая зрелая клетка нашего организма является дочерней и развивается из целой цепочки т.н. прогениторных клеток, обладающих различным потенциалом мультипотентности (каждая новая клеточная популяция имеет более ограниченный потенциал относительно предыдущей генерации). Однако «вершиной» этой цепочки является стволовая клетка-предшественница, обладающая высоким пролиферативным, регенераторным и молекулярно-биологическим потенциалом [2]. Открытие этих свойств стволовых клеток создали ряд перспектив перед медицинским сообществом: от возможности выращивания отдельных тканей и органов с целью дальнейшей трансплантации до регенерации поврежденных тканей «in situ». И в этой связи стало совершенно очевидно, что регенеративная медицина является всеобъемлющей и охватывает все медицинские специальности.
На сегодняшний день в мире активно используется микрофрагментированная стромально-васкулярная фракция адипозной ткани с целью регенерации тканей «in situ». За последнее время терапия стромально-васкулярной фракцией широко зарекомендовала себя в самых различных областях медицины и, конечно же, «не обошла стороной» современную гинекологию. Огромный спектр позитивных молекулярно-биологических эффектов данной субстанции и простота ее выделения характеризует ее как наилучшего «кандидата» для патогенетически оправданной регенеративной коррекции ряда гинекологических нозологий.
Исходя из вышесказанного, важно отметить, что целью данной статьи является освещение крайне актуального и, вместе с тем, не менее инновационного вопроса о месте терапии микрофрагментированной стромально-васкулярной фракцией (SVF-терапия) в современной гинекологии.
SVF-терапия- новое слово в современной гинекологии
Микрофрагментированная стромально-васкулярная фракция (Stromal-Vascular Fraction (SVF)) является универсальной биологически-активной субстанцией. В состав SVF входит целый комплекс стволовых клеточных структур и факторов роста, обуславливающих ее высокий регенераторный потенциал. Ключевой особенностью стромально-васкулярной фракции является полная синергичность молекулярно-биологических эффектов со стороны всех ее составляющих, что обуславливает ее высокую эффективность и универсальность для использования в самых различных сферах медицины [3]. На сегодняшний момент доказано, что микрофрагментированная стромально-васкулярная фракция обладает:
● Выраженным регенераторным эффектом;
● Проангиогенным эффектом;
● Противовоспалительным эффектом;
● Иммуномодулирующим эффектом.
Важно отметить, что молекулярно-клеточный состав стромально-васкулярной фракции является внушительным. Основными клеточными элементами СВФ являются: стволовые клетки жировой ткани, преадипоциты, эндотелиальные клетки-предшественницы, эндотелиоциты, Т-лимфоциты, макрофаги, гладкомышечные клетки, перициты, а также мезенхимальные стволовые клетки. Необходимо упомянуть, что каждый клеточный элемент стромально-васкулярной фракции отличается не только своими морфологическими характеристиками, но и составом своих молекулярных маркеров, что позволило подобрать максимально удачный состав СВФ благодаря использованию современных фрагментирующих технологий (таб.1) [4]. В этой связи важно тезисно рассмотреть функционал каждой клетки СВФ и отметить ее клинико-биологический потенциал.
Таблица 1 [4].
Мезенхимальная стволовая клетка (МСК) играет ключевую роль в составе стромально-васкулярной фракции. Важно отметить, что МСК является универсальным предшественником для большинства тканей организма. Потенциал дифференцировки данного клеточного элемента существенно превышает таковой у других клеток. В сравнении с гемопоэтическими стволовыми клетками МСК носят на поверхности гораздо больше молекулярных маркеров, включая CD34, CD45, CD14, HLA-DR, что отражает их поразительную универсальность и больший спектр возможных взаимодействий [5]. В процессе эмбриогенеза мезенхимальная стволовая клетка имеет 3 пути дифференцировки:
1) Эктодерма (например, нервная ткань)- за счет действия протеинкиназы-А и белка Notch-1;
2) Энтодерма (например, гепатоциты, секреторные островки и т.д.)- за счет взаимодействия с трансформирующим фактором роста (ТФР);
3) Мезодерма (например, остеоциты, хондроциты, адипоциты и т.д.)- также за счет взаимодействия с ТФР, а также рядом факторов (PPAR, Smad3, SOX9).
Таким образом, приоритетная роль мезенхимальной стволовой клетки в стромально-васкулярной фракции отводится именно регенерации ткани. Большое разнообразие линий дифференцировки позволяет использовать МСК как универсальный клеточный источник, стимулируемый паракринно за счет локально продуцируемых факторов роста и сигнальных белков.
Следующим не менее важным звеном в составе стромально-васкулярной фракции являются Т-лимфоциты. Их ключевая функция- поддержание локального иммунного гомеостаза в месте введения СВФ. Т-лимфоциты обладают выраженной паракринной активностью за счет способности к продукции ряда цитокинов [6, 7].
Важно отметить, что Т-хелперы 2 типа активируют ещё одно клеточное звено- тканевые макрофаги 2 типа, также способствующие поддержанию клеточно-молекулярного баланса. Данная субпопуляция макрофагов обладает выраженной противовоспалительной активностью за счет способности к выработке противовоспалительных цитокинов, включая интерлейкины 4, 5, 9 и 13 типов. Также на сегодняшний день доказан и высокий регенераторный потенциал данной клеточной линии при наличии альтерации тканей [8, 9].
Следующим крайне важным компонентом стромально-васкулярной фракции являются адипозные стволовые клетки. Предшественники зрелых адипоцитов обладают выраженной паракринной активностью за счет продукции различных факторов роста, цитокинов и антиоксидантов в интерстиции. Кроме того, адипозные стволовые клетки реализуют противовоспалительный и иммуномодулирующий эффект в тканях за счет тех же молекулярных агентов. Вместе с тем, следует отметить, что активно пролиферирующие преадипоциты могут проявлять значимую фагоцитарную активность в отношении чужеродных микроорганизмов, то есть обладают макрофагоподобным эффектом [10, 11].
Необходимо также отметить гладкомышечные клетки, которые способствуют формированию каркаса в месте введения, восстановлению физиологичной гистоархитектоники и потенциируют армирующий эффект новосинтезированных (de nova) коллагеновых волокон [12].
Заключительным и наиболее важным компонентом в составе стромально-васкулярной фракции являются эндотелиальные стволовые клетки. Данный клеточный элемент обладает выраженным проангиогенным эффектом за счет продукции эндотелиального фактора роста, реализуя ключевые процессы неоангиогенеза. Кроме того, предшественники эндотелиоцитов контролируют реологические свойства крови, ингибируют воспалительные процессы и предотвращают гиперкоагуляционные состояния в тканях [13].
Исходя из вышесказанного, важно резюмировать, что все клеточные элементы стромально-васкулярной фракции демонстрируют функциональную разнонаправленность и одновременную синергичность, что позволяет достичь высокого регенераторного эффекта в месте введения субстанции.
Однако кроме клеточных элементов необходимо рассмотреть молекулярные агенты стромально-васкулярной фракции, способствующие поддержанию локального тканевого гомеостаза [10]:
1) Инсулиноподобный фактор роста-1 (ИПФР-1) способствует поддержанию дифференцировки и пролиферации адипозных стволовых клеток;
2) Фактор роста тромбоцитов поддерживает процессы дифференцировки и пролиферации клеточной массы, а также реализует антиапоптотический эффект и поддерживает процессы хемотаксиса мезенхимальных стволовых клеток;
3) Эндотелиальный фактор роста реализует ключевые процессы неоангиогенеза и васкуляризации ткани в месте введения СВФ;
4) Фактор роста фибробластов поддерживает локальные пролиферативные процессы, способствует рекрутингу и стимуляции активности фибробластов и, соответственно, продукции коллагеновых волокон, реализуя локальный армирующий эффект;
5) Матриксные металлопротеиназы способствуют развитию жировой ткани, а также утолщению и ремодерированию коллагеновых волокон.
Важно отметить, что за счет всех вышеописанных механизмов, реализуемых клеточными элементами и локально продуцируемыми биологически-активными агентами, стромально-васкулярная фракция реализует целый ряд позитивных молекулярно-биологических эффектов в месте введения субстанции [3]:
● Противовоспалительный эффект за счет снижения уровня интерлейкина 1-β и интерлейкина-6, а также супрессии катаболизма интерлейкина-1, связанной с активацией ИЛ-1Rα;
● Повышение уровня гликозаминогликанов за счет активной дифференцировки строгальной стволовой клетки и активации синтеза внеклеточного матрикса хондроцитами;
● Обеспечение тканевого гомеостаза за счет активации синтеза протеаз ADAMTS 4 и 5 типов, а также повышения уровня тканевых ингибиторов металлопротеиназ 1, 3 и 4 типов.
Таким образом, важно отметить, что каждый элемент микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции является одновременно самостоятельной единицей, но вместе с тем может регулироваться паракринно другими компонентами системы регенерации. В этой связи мы резюмируем, что стромально-васкулярная фракция- это весьма гармоничная со всех точек зрения биологически-активная субстанция, обладающая высоким регенеративным и терапевтическим потенциалом.
Методология микрофрагментации липоаспирата и получения микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции
До недавнего времени выделение микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции адипозной ткани возможно было только в лабораторных условиях, в частности в условиях центрифугирования. В итоге после проведения центрифугирования липоаспирата на скорости 2500-3000 оборотов в минуту в течение 4 минут при комнатной температуре способствовало фрагментации жидкости на несколько фракций [3]:
● Верхняя- жировая фракция;
● Средняя- конденсированный липоаспират;
● Нижняя- водная фракция;
● Стромально-васкулярная фракция.
Однако на сегодняшний день стало возможным использование портативных технологий выделения микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции адипозной ткани. Так, единственной зарегистрированной технологией портативного выделения СВФ из липоаспирата является LIPO-STEM DUOTM. Данный инструмент представляет стерильный одноразовый комплект, предназначенный для забора, микрофрагментации и очистки аутолипоаспирата. За счет технологии микрофильтрации в условиях замкнутого цикла также происходит фрагментация субстанции на фракции [14, 15].
Бережная технология фрагментация, используемая в портативных аппаратах микрофрагментации, имеет целый ряд преимуществ, включая эффективную микрофрагментацию липоаспирата, надежную очистку фрагментов тканей, высокое качество полученных клеток, а также быстрота процедуры (обработка 400 мл липоаспирата осуществляется за 5-10 минут) [15]. Учитывая вышесказанное, необходимо рассмотреть основные этапы проведения процедуры портативной микрофрагментации липоаспирата.
В рамках подготовительного этапа необходима подготовка т.н. раствора Кляйна. Данный раствор необходимо ввести локально в локусе липосакции, что позволит уменьшить объем кровопотери создать инфильтративный объём в данной области. В качестве источника липоаспирата возможно выбрать анатомические зоны: живот, ягодицы и бедро, при этом, живот является предпочтительным местом для проведения липосакции.
После забора аутологичного липоаспирата к разъему «WASH IN» необходимо подсоединить емкость с физиологическим раствором через инфузионную систему с целью выведения воздуха из системы в пакет для отходов и наполнения системы раствором.
После этого необходимо ввести через порт «LIPO IN» полученный липоаспират, а затем плавными движениями шпателя по пакету устройства необходимо провести липоаспират через внутренний фильтр в нижнюю часть устройства. Данный шаг способствует микрофрагментации и очищению липоаспирата от крови и липидных капель. Данный процесс выполняется, пока содержимое пакета не приобретет бледно-желтый цвет. Затем необходимо перекрыть поступление физиологического раствора, а его избыток вывести шпателем через открытый порт «WASH IN». Полученную субстанцию или уже сформированную микрофрагментированную стромально-васкулярную фракцию выводят через порт «LIPO OUT» для дальнейшего использования [14, 15].
Таким образом, важно отметить, что использование устройства LIPO-STEM DUOTM позволяет бережно получить высококачественную стромально-васкулярную фракцию путем микрофрагментации аутолипоаспирата за короткое время. Данный факт позволяет использовать портативные технологии для получения СВФ с высокой эффективностью и скоростью, что позволит существенно сократить время проведения процедуры и расходы клиники на лабораторное оборудование.
SVF- терапия в современной гинекологии:
на пути к «регенеративной революции»
На сегодняшний день спектр применения стромально-васкулярной фракции в медицине в целом является в буквальном смысле «безграничным». Так, на сегодняшний день доказано, что микрофрагментированная СВФ адипозной ткани с высокой клинической эффективностью и безопасностью активно используется в следующих областях медицины [16]:
● В офтальмологии: для лечения ишемической ретинопатии;
● В травматологии: для лечения остеоартритов, тендинопатий;
● В эндокринологии: для лечения диабетической стопы;
● В нейрохирургии: для регенерации периферических нервов;
● В пластической хирургии: для лечения атрофических деформаций;
● В онкологии: для лечения атрофических процессов после химиолучевой терапии;
На настоящий момент микрофрагментированная стромально-васкулярная фракция адипозной ткани в рамках современной гинекологии имеет наибольший потенциал в лечении склероатрофического лихена, а также ректовагинальных свищей [17]. В этой связи необходимо рассмотреть результаты имеющихся научных исследований, демонстрирующих высокую эффективность и безопасность использования СВФ в современной гинекологии.
Так, по данным Tamburino S. et al. (2016), использование SVF-терапии у пациенток с верифицированным склероатрофическим лихеном после хирургической коррекции имеющихся стриктур способствует выраженному снижению интенсивности клинической симптоматики и коррекции атрофических изменений вульвы. При этом было выявлено, что значительное нивелирование симптоматики у пациенток отмечался через 2 месяца после лечения, а затем показатели оставались стабильно высокими с небольшим увеличением между 2 и 5 месяцами [18].
Вместе с тем, необходимо отметить результаты исследования отечественных коллег, включавшего 24 пациентки с верифицированными ректовагинальными свищами после предшествующей химиолучевой терапии по поводу злокачественных новообразований органов репродуктивной системы. Согласно полученным данным, у пациенток на фоне SVF-терапии отмечалось стабильное уменьшение средних размеров свищей: диаметр до лечения- 2,5 см, через 3 месяца- 1,35 см, через 6 месяцев- 1,12 см. Кроме того было выявлено, что у всех пациенток отмечалась полная эпителизация свищей и полное отсутствие рецидивов [19].
Весьма интересными оказались результаты исследования Monreal, J. et al. (2020), включающего 39 пациенток с верифицированным склероатрофическим лихеном. В качестве терапии у пациенток был выполнен липографтинг вульвы с использованием аутологичной жировой ткани и стромально-васкулярной фракции. В результате было выявлено, что после терапии у 95% пациенток наблюдалось значимое снижение баллов согласно модифицированному опроснику вульвовагинальных симптомов как через 6, так и через 24 месяца после лечения (p<0,05). Было продемонстрировано значимое улучшение состояния пациенток по каждому из четырех доменов шкалы: симптомы и признаки заболевания, социальное функционирование и качество сексуальной жизни (p<0,05 по всем доменам) [20].
В заключение необходимо представить результаты клинического наблюдения Kim M. et al. (2021) двух пациенток 61 и 59 лет, перенесших химиолучевую терапию по поводу рака прямой кишки. У обеих пациенток после проведенного лечения были верифицированы ректовагинальные свищи. Исходя из этого, была проведена фистулопластика с последующим введением микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции адипозной ткани. В результате у обеих пациенток через 5 месяцев наблюдения вовсе не отмечалось признаков газовой и каковой инконтиненции, в течение 1 года рецидивов свищей не наблюдалось [21].
Заключение
Таким образом, в рамках данной статьи нам удалось рассмотреть весьма нестандартный вопрос использования микрофрагментированной стромально-васкулярной фракции в регенеративной медицине. Установлена «регенеративная роль» каждого компонента (как молекулярного, так и клеточного) СВФ с точки зрения их биологических эффектов.
Важно отметить, что на сегодняшний день «доказательное досье» использования СВФ в различных сферах медицины является не столь внушительным ввиду новизны самой методики. Но несмотря на это, становится совершенно очевидно, что количество исследований разной степени доказательности, демонстрирующих эффективность и безопасность SVF-терапии, будет увеличиваться в геометрической прогрессии, поскольку данный метод является не только чрезвычайно удобным, но также патогенетически оправданным и эффективным.
Исходя из вышесказанного, необходимо отметить, что современная регенеративная медицина демонстрирует поразительные темпы развития и укрепляется в самых различных медицинских сферах, включая гинекологию. Можно предположить, что регенеративная медицина на современном этапе — это медицина «без границ», позволяющая пациентке и клиницисту быть на «одной волне»- «волне» в достижении клинического успеха и повышения качества жизни!
Список литературы
1. Mao, A.S. and Mooney, D.J., 2015. Regenerative medicine: Current therapies and future directions. Proceedings of the National Academy of Sciences, 112(47), pp.14452-14459.
2. Lovell-Badge, R., 2001. The future for stem cell research. Nature, 414(6859), pp.88-91.
3. Goncharov, E.N. et al., 2024. Analyzing the Clinical Potential of Stromal Vascular Fraction: A Comprehensive Literature Review. Medicina, 60(2), p.221.
4. Павлов В.Н. и др. СОВРЕМЕННЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ КЛИНИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ СТРОМАЛЬНО-ВАСКУЛЯРНОЙ ФРАКЦИИ ЖИРОВОЙ ТКАНИ // Медицинский вестник Башкортостана. 2020. №6 (90).
5. Ding, D.C., Shyu, W.C. and Lin, S.Z., 2011. Mesenchymal stem cells. Cell transplantation, 20(1), pp.5-14.
6. Busato, A. et al. Simple and Rapid Non-Enzymatic Procedure Allows the Isolation of Structurally Preserved Connective Tissue Micro-Fragments Enriched with SVF. Cells 2020, 10, 36.
7. Dulong, J. et al. CD40L-expressing CD4+ T cells prime adipose-derived stromal cells to produce inflammatory chemokines. Cytotherapy 2022, 24, 500–507.
8. Contreras, G.A. et al. Macrophage infiltration in the omental and subcutaneous adipose tissues of dairy cows with displaced abomasum. J. Dairy Sci. 2015, 98, 6176–6187.
9. Dey, A. et al. A multi-colour confocal microscopy method for identifying and enumerating macrophage subtypes and adherent cells in the stromal vascular fraction of human adipose. J. Immunol. Methods 2021, 491, 112988.
10. Bora, P.; Majumdar, A.S. Adipose tissue-derived stromal vascular fraction in regenerative medicine: A brief review on biology and translation. Stem Cell Res. Ther. 2017, 8, 145.
11. Matsuo, F.S. et al. RANKL induces beige adipocyte differentiation in preadipocytes. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2020, 318, E866–E877.
12. Guimarães-Camboa, N. et al. Pericytes of Multiple Organs Do Not Behave as Mesenchymal Stem Cells In Vivo. Cell Stem Cell 2017, 20, 345–359
13. Gulyaeva, O.; Dempersmier, J.; Sul, H.S. Genetic and epigenetic control of adipose development. Biochim. Biophys. Acta Mol. Cell Biol. Lipids 2019, 1864, 3–12
14. LIPO-STEM. Mesenchymal stem cells collection kit from adipose tissue. Surgical technique (BPB MEDICA).
15. [Электронный ресурс]: https://mst.ru/catalog/lipo-stem-duo/
16. Nguyen, Andrew, et al. "Stromal vascular fraction: A regenerative reality? Part 1: Current concepts and review of the literature." Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery 69.2 (2016): 170-179.
17. Bapat, A., 2022. Stem Cells and Recent Advances in Aesthetic and Regenerative Gynecology. Aesthetic and Regenerative Gynecology, pp.327-357.
18. Tamburino S. et al. The Role of Nanofat Grafting in Vulvar Lichen Sclerosus: A Preliminary Report. Arch Plast Surg. 2016 Jan;43(1):93-5. doi: 10.5999/aps.2016.43.1.93. Epub 2016 Jan 15. PMID: 26848453; PMCID: PMC4738136.
19. Терюшкова Ж.И., Васильев В.С., Важенин А.В. и др. Липографтинг и стромально-васкулярная фракция жировой ткани в лечении пациенток с постлучевыми ректовагинальными свищами. Онкологическая колопроктология. 2019;9(1):34–41
20. Monreal, J., 2020. Safety and efficacy of stromal vascular fraction enriched fat grafting therapy for vulvar lichen sclerosus. Cureus, 12(2).
21. Kim, M., Lew, D.H., Roh, T.S. and Song, S.Y., 2021. Stromal vascular fraction injection to treat intractable radiation-induced rectovaginal fistula. Archives of Plastic Surgery, 48(01), pp.127-130.
Получить консультацию
Наш специалист с радостью ответит на ваши вопросы
