Chondro-Gide® – Приготовление фибринового клея

Выделение элементов фибринового клея из крови пациента.

Чтобы выделить элементы фибрина, необходим забор 50 мл крови  пациента. Производится забор крови и её разведение в 3.8% растворе цитрата натрия, в пропорции 9:1. Далее - центрифугирование в течение 10 минут со скоростью 3000 оборотов в минуту, чтобы отделить плазму.

Очистка фибриногена.

Очистка плазматического фибриногена выполняется через глициновую технику осаждения. Под управляемой температурой и концентрацией, глицин выделяет только плазматический фибриноген. Безводный сульфат магния и сульфат бария, при заключительной концентрации 20 мМоль/л и 90 г/л, соответственно, добавляются к 25 мл плазмы. После перемешивания в течение одного часа, плавающий на поверхности слой центрифугируется и отделяется. Эта процедура была повторена еще раз. После измерения объёма плавающего на поверхности слоя плазмы, глицин медленно доводится до конечной концентрации 2.2 Моль/л. Снова, изделие перемешивается в течение 30 минут, после чего снова центрифугируется в течение 20 минут. Плавающий на поверхности слой (верхний слой) отделяется, и доводится до первоначального объема плазмы, используя 0.055 М раствор цитрата натрия при pH 7.4. После этого вновь выполняется глициновое осаждение (преципитация).

Наконец, полученная субстанция повторно растворяется в фосфатно-солевом буферном растворе (PBS) до конечной концентрации 800 мг/мл, разделяется на равные части и замораживается при -20C°.